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一、大肠杆菌发酵经验总结

1、 补料速率与比生长速率直接影响着乙酸的生成速率和积累量， 所以适当的控制补料速率和比生长速率，对于控制乙酸的量有很好的效果。

2、必须要保证充足的溶氧，并严格控制pH值，而且补酸碱的速率尽量缓和，不能太快；温度对于蛋白的表达也有很重要的影响， 较低的发酵温度下所生产出的蛋白大多是有活性的，而较高的发酵温度下产生的蛋白大多一包涵体形式存在。

3、选取合理的诱导时间非常重要， 一般的诱导时间选在指数生长后期，而且诱导时的比生长速率最好能控制在0.2之内， 选在此时诱导，优势是：

（1）将菌体的快速生长期与蛋白合成期分开，使这两个阶段互不影响，有利于蛋白的高表达；

（2）已经得到了大量的菌体，而且菌体的生物量基本接近稳定，不论是从动力学角度，还是能耗，物料成本方面，都比较合理。

4、补料过程中的碳氮比也很重要。若氮源过高，会使菌体生长过于旺盛，pH偏高，不利于代产物的积累；氮源不足，则菌体繁殖量少从而影响产量；碳源过多，则容易形成较低的pH，抑制菌体生长；碳源不足，则容易引起菌体的衰老和自溶。另外，碳氮比不当还会引起菌体按比例的吸收营养物质，从而直接影响菌体的生长和产物的合成。

5、一般情况下，对于一个稳定的发酵工艺下，如果总是 在固定的发酵时间段出现溶菌现象，而且能排除噬菌体和染菌的可能性后，那就可能是因为碳氮比不合理造成的。 可以适当调整碳氮比。