发酵工艺:微藻培养方案之高密度异养发酵法生产微藻发酵制品

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何为微藻?

微藻不是一个分类学的名词,而是指那些在显微镜下才能辨别其形态的微小的藻类群体。微藻通常是指含有叶绿素a并能进行光合作用的微生物的总称,属于原生生物的一种。目前应用生物技术进行大量培养或生产的微藻分属于8个藻门:蓝藻门、隐藻门、甲藻门、金藻门、黄藻门、硅藻门、硅藻门、裸藻门和绿藻门

微藻制品在生物各领域的应用情况

医药工业

A.不饱和脂肪酸(DHA、RHA)在婴儿食品和保健品中的使用都深受人们的欢迎

B.微藻胶体(ECP)有较强的抗肿瘤活性引起国内外专家的关注

C.微藻富含PUFA,能减低血液的粘稠度, 降低血液中胆固醇和低密度脂蛋白的含量,从而起到预防和治疗心血管疾病的作用

D.微藻多糖能够抗辐射、抗氧化,并能提高机体免疫力、促进淋巴细胞转化和抑制癌细胞增殖

E.杜氏藻中富含的β-胡萝卜素可抑制自由基的活性,减少过氧化物对组织的损伤,提高吞噬细胞和淋巴细胞的功能,促进细胞释放一些抗肿瘤因子,对白内障、黄斑变性病以及心血管病有一定的防护作用

F.小球藻内含有的生长因子(CGF),能促进机体特别是儿童的生长发育和体质的增强,并能使免疫系统功能得到强化。

食品工业

微藻(小球藻、栅列藻、新月藻、螺旋藻、杜氏盐藻)的营养价值比较高,原因是:

A. 蛋白质含量高达65-70%;细胞内含有多种维生素,特别是VB12最丰富;

B. 富含8种人体必需的氨基酸; 某些藻类(如螺旋藻、杜氏藻)中含大量的β-胡萝卜素,可有效地抗生物氧化;

C. 含有多种微量元素,如铁、钾、钠、镁和钙等;

D. 含有大量的藻胆蛋白,能增强机体的免疫功能。

动物饲料

小球藻等可作为优质饵料,可提高水产动物,特别是海珍品育苗的成活率,降低育苗成本,提高幼体的免疫力和活力,还可使观赏鱼的体色鲜艳。

日本DIC公司在泰国兴建的螺旋藻养殖场年产藻粉150T,其中作饵料或饲料的就50-60t;墨西哥某公司年产藻粉300T,其中有100T用于饵料或饲料;我国台湾省年产300T藻粉,其中有120T用于虾苗和其它海珍品、观赏鱼类、鸟类的饲料。

环境监测

Ø小球藻可空气甲醇蒸汽和四氯乙烯

Ø莱茵衣藻检测气体中的甲醇、甲醛

净化环境

Ø分解海洋中的有机毒物

三丁基锡可被绿藻门的镰形纤维藻、硅藻门的中肋骨条藻降解为二丁基锡,绿藻门的小球藻可将三丁基锡降解为二丁基锡和一丁基锡,此时海洋环境大幅降低。

Ø吸附废水中的重金属

常规的重金属处理方法包括:化学沉淀、溶剂萃取、离子交换、电化学处理等,海洋微藻作为吸附材料处理重金属的优点有:原料易得、不产生二次污染、吸附容量大、去除率高、洗脱简单方便吸附剂和重金属的回收。

美容化妆品

A. 微藻营养液能提供皮肤所需的氨基酸、藻多糖、超氧化物歧化酶(SOD)等多种营养活性成分;

B.虾青素等多种高级抗氧化剂,有清除自由基的能力,起到防皱、抗辐射、抗衰老的作用;

C. 微藻细胞中可提取能吸收紫外线的酪氨酸制剂,可防晒、祛斑;

D.螺旋藻及其酶解产物还可刺激皮肤的新陈代谢,防止皮肤角化 。

传统微藻培养方式

开放式跑道培养系统

培养池以水泥、黏土、金属等材料储存培养液,以自然光为光源,借助风能、电能驱动搅拌通入空气,或通过鼓泡式、气石等完成二氧化碳的供应。

Ø优点:投资少、操作简单

缺点:易污染、易染菌、易受到外界环境及天气的影响、采收费用高、效率低、占地面积大、只能从上面透光

封闭式光反应器

此类生物反应器主体为透光材质,依靠气泵作为推动力进行传质,主要用于植物离散细胞、微藻和光合细菌等的大规模培养,多用于代谢物类型的微藻制品生产。

比对上述跑到培养系统,优点明显:

A. 污染水平降低,可以做到单种或纯种培养;

B. 可在室内进行培养,不受场地限制;

C. 相比于跑道池系统,尤其适合代谢制品的微藻培养。

异养发酵法培养微藻的优势

A.微藻生长速度,细胞密度提高。异养发酵的细胞密度可到达传统的大肠杆菌或酵母的水平;

B. 异养培养技术更易于控制且保证稳定生产,重复性高,连续生产质量稳定;

C. 通过驯化微藻的代谢方向和遗传特性,解除了光合作用对微藻的控制,缩短了微藻的代谢周期;

D. 可广泛借鉴传统高密度微生物发酵技术及设备经验,加快产业化速度。

异养发酵需要解决的问题

1.藻种的驯化

传统的微生物驯化是以产量最大化、菌种品质的稳定性为目的的,而微藻除此之外还需进行对异养能力的驯化,需要改变代谢路径,适应异养华体会体育最新地址 。可进行异养发酵法培养的微藻包括:蓝藻门、隐藻门、甲藻门、金藻门、黄藻门、硅藻门、硅藻门、裸藻门和绿藻门共计8门66属近百种。

2.华体会体育最新地址 的优化

异养发酵微藻一般是在光能自养华体会体育最新地址 的基础上添加碳源(糖类、乙酸钠)、蛋白水解物(蛋白胨、牛肉膏、酵母浸粉、尿素等)、B族维生素(生长刺激因子)等物质。

3.必须做到纯种

现代发酵法生产微生物制品绝大多数要求纯种发酵,微藻发酵同样如此,在整个发酵培养过程中必须做到纯种且不染菌,然而由于微藻生长速率相对普通的细菌等极慢,一旦染菌容易爆发,导致倒罐等,因此微藻发酵比传统类型的发酵更需要注意染菌防治。

4.高密度设计

异养发酵条件下,微藻的浓度水平接近大肠或酵母的发酵水平,美国Martek公司的培养EPA时的最大浓度达到48g/L,生产VC时最大浓度甚至达到100g/L,因此整个微藻发酵体系需要按照高密度培养方案设计

5.后处理

微藻后处理及产物提取及设备选型参考常规微生物发酵模型即可。

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