自然界的微生物由于种类不同,它们对营养的需求也有差别,因此在菌种分离、保藏以及工业发酵中,都要根据该菌株对营养需求的特点来配制相应的华体会体育最新地址 。
在科研生产上按所用原料不同,又可分两类:应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然华体会体育最新地址 ;应用化学药品配成并标明成分的,称为合成华体会体育最新地址 或综合华体会体育最新地址 。含化学试剂的华体会体育最新地址 ,大多为合成华体会体育最新地址 。由于液体华体会体育最新地址 不便长期保留,现已有公司改制成粉末。华体会体育最新地址 在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此保管时必须防潮、避光,置低温处保存。对一些需严格灭菌的华体会体育最新地址 (如组织华体会体育最新地址 ),较长时间的储存必须放在2~6℃的冰箱内。常见华体会体育最新地址 有以下一些。
一、细菌华体会体育最新地址
配方一:牛肉膏琼脂华体会体育最新地址
牛肉膏0.03 g,蛋白胨1.0g,氯化钠0.05g,琼脂1.5 g,水100 ml。在烧杯内加水100 ml,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,置火上加热,待各组分溶解后,加人琼脂,不断搅拌以免粘底。待琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH为7.2~7.6,分装各试管,加塞,用高压蒸汽灭菌30 min备用。
配方二:肉汤华体会体育最新地址
取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250 g,用刀剁成肉末,加人500 ml蒸馏水和5g蛋白胨。煮沸,转文火炖2h,过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液调pH为7。5左右。每支试管内加人10 ml。肉汤和少量碎肉末,灭菌,备用。
配方三:根瘤菌华体会体育最新地址
葡萄糖10g,磷酸氢二钾0.05 g,碳酸钙3g,硫酸镁0.02 g酵母粉0.04 g,琼脂20 g,水1000 ml,1%结晶紫溶液1mL。先把琼脂加水煮沸溶解,再分别加入其他组分,搅拌溶解后,分装,灭菌,备用。
配方四:LB华体会体育最新地址
LB华体会体育最新地址 的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L,酵母提取物(Yeast extract) 5g/L,氯化钠(NaCl) 10g/L
另外根据经验值用NaOH调节该华体会体育最新地址 的pH,使其达到7.4(该pH适合使用最广的原核表达菌种E.coli的生长)
二、放线菌华体会体育最新地址
配方一:淀粉琼脂华体会体育最新地址 (高氏华体会体育最新地址 )
可溶性淀粉2 g,硝酸钾0.1 g,磷酸氢二钾0.05 g,氯化钠0. 05 g,硫酸镁0.05 g,硫酸亚铁0.001g,琼脂2g,水100 mL。先把淀粉用5 ml水调成糊状后,倒入95 mL水,搅匀后加入其他药品,使其溶解。煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。调整pH为7.2~7.4,分装后灭菌,备用。
配方二:面粉琼脂华体会体育最新地址
面粉60g,琼脂20 g,水1000 mL。用水将面粉调成糊状,加水到500 mL,文火煮30min。另取500 mL水,放入琼脂,加热煮沸到溶解,把两液调匀,补充水分,调整pH到7.4,分装,灭菌,备用。
三、真菌华体会体育最新地址
配方一:萨氏(Sabouraud's)华体会体育最新地址
蛋白胨10g,琼脂20 g,麦芽糖40 g,水1000 mL。先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40g麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,溶解后分装,灭菌,备用。本华体会体育最新地址 可培养许多种类真菌。
配方二:马铃薯糖琼脂华体会体育最新地址
取200 g切成小块,加水1000 ml,煮沸30 min后,补足水分。在滤液中加入10 g琼脂,煮沸溶解后加糖20g(用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖),补足水分,分装,灭菌,备用。将该华体会体育最新地址 的pH调为7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。
配方三:豆芽汁华体会体育最新地址
黄豆芽100 g,琼脂15 g,葡萄糖20g,水1000 mL。洗净黄豆芽,加水煮沸30 min,用纱布过滤,滤液中加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌溶解,补足水分到1000 mL,分装,灭菌,备用。将该华体会体育最新地址 的pH调为7.2~7.4,可用来培养细菌和放线菌。配方四:豌豆琼脂华体会体育最新地址 豌豆80粒,琼脂5g,水200 mL。取80粒干豌豆加水适量,煮沸1h,纱布过滤,在滤液中加入琼脂,煮沸溶解,分装,灭菌,备用。
四、酵母华体会体育最新地址
1、基础华体会体育最新地址
YPD 或YEPD:Yeast Extract Peptone Dextrose Medium(1L),又叫酵母浸出粉胨葡萄糖华体会体育最新地址 ,加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖(YPD)琼脂华体会体育最新地址
配方:1% Yeast Extract(酵母膏),2% Peptone(蛋白胨),2% Dextrose (glucose)葡萄糖,(若制固体华体会体育最新地址 ,加入2%琼脂粉)
配制方法:
1 溶解10gYeast Extract(酵母膏),20gPeptone(蛋白胨)于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉
2加入20g Dextrose (glucose)(葡萄糖)
3 高压 115 度 15min
注:葡萄糖,yeast extract ,peptone溶液混合后在高温下可能会发生化学反应,导致华体会体育最新地址 成分变化,所以要分别灭菌后再混合。葡萄糖可以过滤除菌,也可以115℃ 15min灭菌,(葡萄糖溶液灭菌后加入)。
2、基本华体会体育最新地址
- NaAc 10g, (NH)2SO45g, NaHPO405g, MgSO4-7H20 1g,维生素B 100ug,蒸馏水100mL,处理琼脂2g ,pH自然,121℃灭菌15min
- 葡萄糖2%, KHPO40 1%, MgSO4 · 7H20 0.0 5%,(NH)2S04,0.05% ,处理琼脂2%。蒸馏水配制,pH 6。0,121℃灭菌15min
- 葡萄糖10g, NaCl 0.0 1g, (NH )2SO41g,微量元素母液1mL, K2HPO4, 0 125g,维生素母液1mL, KI 0.0001g, MgSO4·7H20 0.05g, CaCl·2H20 0.0 1g,蒸馏水1000mL。 pH 5.5~6.0,115℃灭菌25min
微量元素母液: HPO41mL,ZnSO4·7H20 7mg,CuSO4-5H201mg, CaCl2-6H20 5mg,蒸馏水100mL。
维生素母液:烟碱酸40mg,肌醇200mg,泛酸20mg,对氨基苯甲酸20mg,核黄素20mg,维生素B, 40mg,生物素0.02mg,吡哆醇40mg,蒸馏水100mL。
3、YNB华体会体育最新地址
YNB华体会体育最新地址 由以下A、B、C三种溶液组成:
A液,维生素混合液:维生素B, 1000mg,烟酸400mg,吡哆醇400mg,生物素20mg,泛酸钙2000mg,核黄素200mg,肌醇10000mg,对氨基苯甲酸200mg,无离子水1000mL
B液,微量元素液: HBO4500mL,MnSO4·7H20 200mg,ZnSO4-7H2O 400mg, CuSO4-7H2O 40mg, FeCls • 6H20 100mg,Na2MnO3200mg,无离子水1000mL。
C液,其它无机盐液:KI 0.0 1mg,CaCl2-2H20 0.0 1g,K2HPO40.015g,KH2PO4 0.085g,MgSO4·7H20 0.05g,NaCl 0.01g,无离子水1000ml。
配制方法:取A液1mL、B液1mL、C液10mL、无离子水1000mL,混合,调pH为6。5,即成。说明:①配制YNB时,先分别将已灭菌分装的A、B液各1mL与C液10mL,在无菌条件下混合,再将已灭菌的(NH4)2SO4按0.05%的量加人到无离子水中,混匀即可。
注:配制糖发酵华体会体育最新地址 时,方法同上,只是按2%浓度加入不同的糖液。
五、食用菌菌种华体会体育最新地址
配方一:马铃薯-蔗糖-琼脂华体会体育最新地址
20%马铃薯煮汁1000 mL,蔗糖20 g,琼脂18 g。马铃薯洗净去皮后,切成小块。称取小块200 g,加水1000 mL,煮沸20min后,过滤。 在滤汁中补足水分到1000 mL,即成20%马铃薯煮汁。在汁中加入琼脂和蔗糖,煮沸,溶解后,补足水分,分装,灭菌,备用。pH要求不严,可以不测定。
配方二:综合马铃薯华体会体育最新地址
20%马铃薯煮汁1000 mL,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5 g,葡萄糖20 g,维生素10 mg,1脂18g。先配制20%马铃薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整pH到6,分装,灭菌,备用。该华体会体育最新地址 用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
六、蓝藻华体会体育最新地址
BG-11华体会体育最新地址
母液1: NaNO3,300mg/mL,NaCO3,4mg/mL;
母液2: MgSO4·7H20 15mg/mL;
母液3: CaCl2·2H20;
母液4:柠檬酸(CA) 1.2mg/mL,FeCA 1.5mg/mL,Na2EDTA 0.08mg/mL;
母液5: KHPO4 ·3H20 8mg/mL:
母液6: HBO32.86mg/mL,MnCl-4H20 1.81mg/mL,ZnSO4·7H20 0.0222mg/mL,NaMo04·2H20 0.03mg/mL,CusO4-5H20 0.079mg/mL,Co(NO3)2·6H20 0.0494mg/ml。
取母液1、2、3、4、5各5mL,取母液6 1mL,加蒸馏水至1000mL,调pH值为8。0.0 BG-11固体华体会体育最新地址 含琼脂1%
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