hth网页入口

抗体和重组蛋白保存得当与否，直接决定了抗体和重组蛋白的活性使用效果，如果保存得当，抗体和重组蛋白活性大部分都可以维持数年。

无论是保存还是运输，抗体和重组蛋白均应避免反复冻融。因为反复冻融的条件下，冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构，导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象改变，从而降低抗体的结合能力，也加快了抗体球蛋白和重组蛋白的降解速度。

①收到抗体和重组蛋白后该如何操作？

对于液态的抗体或重组蛋白，在收到货物后，可以在 4℃，5000g左右离心 3 分钟，以使管壁和管盖上的液体离心至保离心管底部，然后再打开管盖进行分装和保存如果抗体和重组蛋白是干粉状态，则可使用4℃，10000g离心3min，以使干粉离心至离心管底部。

分装的好处：

（1）分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害，同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体和重组蛋白造成的污染可能性。

（2）分装的量以一次实验用完为好，最少不能少于 10µl 每份。因为分装体积越小，抗体和重组蛋白的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。

②抗体和重组蛋白的长期保存

对于大部分抗体和重组蛋白，比较合适的保存方式是：抗体分装后保存在 - 20℃，重组蛋白分装后保存在 - 80℃。

③抗体和重组蛋白的短期保存

大部分抗体和重组蛋白收到后 4℃短暂保存 1~2 周，对抗体和重组蛋白活性没有影响。如果抗体和重组蛋白很快会使用（1~2 周内），推荐在 4℃保存，这是为了避免反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害。最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体和重组蛋白。

④抗体保存时的其他注意要点

（1）复融后的分装抗体和重组蛋白如果一次用不完，将剩余母液保存在 4℃，避免再冻起来。

（2）抗体和重组蛋白工作液应该当天配制当天用完，4℃保存尽量不要超过 1 天。

（3）绝对避免将抗体和重组蛋白保存在自动除霜冰箱中，将抗体和重组蛋白保存在冰箱里层，避免温度变化造成反复冻融。

⑤抗体和重组蛋白的运输条件

一般的运输过程需要 1~2 周的时间，所以应当保持抗体始终处于低温的环境中，由于干冰具有很好的保持低温的效果，运输过程中干冰的挥发也不会造成液体的出现，因此抗体或者重组蛋白常被保存于干冰中运输。如果运输的时间较短，可以采用在4℃的条件下进行运输，4℃运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害。

⑥抗体和重组蛋白的稳定性

（1）抗体是免疫系统中最重要的分子之一，其稳定性是自然进化筛选的结果，在众多物种中，抗体分子形成了保守而稳定的结构。

（2）抗体具有较高的 Tm 值，在室温下，甚至短时间温度达到 50~60℃，抗体分子都能维持正确折叠，保持其应有的活性。

（3）抗体和重组蛋白的纯度。采用先进的抗体和重组蛋白纯化技术，确保抗体和重组蛋白产品的高纯度，因为抗体和重组蛋白纯度高，特异性好，效价更高。此外，提高抗体和重组蛋白的纯化也有利于提高他们的稳定性。

（4）抗体和重组蛋白的浓度。合理的控制抗体和重组蛋白的浓度可减少容器表面吸附造成的物质损失，避免过高或过低的浓度，以维持抗体和重组蛋白稳定性。大部分抗体和重组蛋白浓度可调节至 1mg/ml。

⑦重组蛋白保存的其他注意事项

重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式，原核细胞表达的重组蛋白通常采用冻干粉状态保存，真核细胞表达的重组蛋白通常采用溶液态保存，这样使得重组蛋白非常稳定，在 - 80℃条件下可保存数年。

冻干粉在使用前需进行溶解，其中溶解的方法非常关键，因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意，这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。

（1）对于冻干粉保存的蛋白，使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可，加入无菌水后轻轻摇晃使蛋白溶解，再用移液枪的枪头轻吹几下即可完全溶解，切记不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。

（2）重组蛋白的保护剂。在冻干和储存过程中常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。通常加 8%（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集，甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。