大肠杆菌常用华体会体育最新地址 配方

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  1. LB(Lysogeny Broth) (10 g/liter tryptone, 5 g/L yeast extract, and 10 g/L NaCl,0-7.2) 能够允许大肠杆菌在摇瓶中,正常培养条件下(250 rpm)生长到OD600 2-3左右。
  2. M9 minimal medium (11.3 g/L M9 salts [5×],1 mM CaCl2, 1 mM MgSO4·7H2O (0.25g/L), 2.45 μM 柠檬酸铁, and 0.03 mM 硫胺素)
  3. SOB(Super Optimal Broth)华体会体育最新地址 :2 % 胰蛋白胨,5 % 酵母提取物, 10 mM NaCl, 2.5 mM KCl, 10 mM MgCl2, 10 mM MgSO4。培养大肠杆菌在普通条件(250rpm)下摇瓶培养,菌浓可达到OD600 3-5左右,如果提高转速到350 rpm, OD600最高能够达到10-15。在SOB华体会体育最新地址 中的大肠杆菌具有更高的转化效率,因此常用SOB华体会体育最新地址 制备感受态细胞。
  4. SOC(Super Optimal broth with Catabolite repression)华体会体育最新地址 :2 % 胰蛋白胨,5 % 酵母提取物, 10 mM NaCl, 2.5 mM KCl, 10 mM MgCl2, 10 mM MgSO4, 20 mM葡萄糖。利用SOC华体会体育最新地址 进行转化反应时,热激后细胞生长的速率会比LB华体会体育最新地址 中高出很多。
  5. 2×YT 华体会体育最新地址 :6 %胰蛋白胨,1 % 酵母提取物, 0.5% NaCl。华体会体育最新地址 中营养更丰富了,细胞能够生长更长的时间,浓度达到更高的值。主要用来进行大肠杆菌以及像是M13这样的细菌噬菌体的培养。由于大肠杆菌的浓度很高,在生产大量的噬菌体的同时,宿主仍然是存活的。
  6. TB(Terrific Broth)华体会体育最新地址 :2 % 胰蛋白胨,4 % 酵母提取物, 72 mM K2HPO4, 17 mM KH2PO4, 0.4 % glycerol。跟LB华体会体育最新地址 相比,TB华体会体育最新地址 中除了多出20 %的胰蛋白胨和380 %的酵母提取物以外,还多了 0.4 % 的甘油作为额外的碳源。所有这些元素能够支持大肠杆菌在正常的摇瓶培养条件下生长到 OD600 5-8。 TB华体会体育最新地址 通常用于实验室规模的蛋白质表达和质粒提取。
  7. SB (Super Broth)华体会体育最新地址 :2% 胰蛋白胨, 2%酵母提取物, 0.5% NaCl。与LB华体会体育最新地址 相比,SB华体会体育最新地址 成分中多出了220%的胰蛋白胨和380%的酵母提取物。因此SB华体会体育最新地址 富含超多量的胰蛋白胨和酵母提取物。据估计蛋白胨和酵母提取物中包含的主要营养元素远远超过细胞生长达到饱和时所需的量。SB华体会体育最新地址 主要用于质粒以及蛋白质的提取。
  8. TSB胰蛋白胨大豆肉汤华体会体育最新地址

胰蛋白胨1.5%(g/100ml),大豆蛋白胨0.5%(g/100ml),氯化钠0.5%(g/100ml)用蒸馏水配制而成,调节pH为7.2±0.2,经121℃压力蒸汽灭菌后使用。

本华体会体育最新地址 营养丰富,对某些较难生长的细菌均能生长,可用于各种细菌的增殖培养,亦可用作基础华体会体育最新地址 。

  1. M9:(1)先配制1M的MgSO4: MgSO4·7H2O 2.46g 加双蒸水10ML溶解,高压灭菌备用;

(2)配制1M的Cacl2: Cacl2·6H2O 2.191g 加双蒸水10ML溶解,高压灭菌备用;

(3)再配制5×M9盐溶液:Na2PO4·7H2O 12.8g, KH2PO4 3.0g,Nacl 0.5g,NH4cl 1.0g,加双蒸水200ml溶解,121度灭菌15分钟,备注:以上三样分别配制,分别装瓶,可以一起送去高压。

(4)配制20%的葡萄糖溶液:4g葡萄糖加双蒸水20ml溶解,0.22微米滤器过滤除菌;

(5)无菌操作配制M9华体会体育最新地址 5×M9盐溶液 200ml,1M的MgSO4 2ml,20%的葡萄糖溶液 20ml,1M的Cacl2 0.1ml,加灭菌双蒸水至1000ml

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